为什么PCR实验室要分区隔离? 依据国家法规,在专业的PCR实验(比如临床PCR检验实验室)室通常需要做到四区隔离(或至少是三区隔离)的要求。 一般常见的三区指的是: 1.试剂配制区:PCR反应系统配制区。 2.标本处理区:包括扩展模板的制备,也就是我们经常提取DNA的地方;3.PCR扩增和产品分析区域:PCR扩增区域,也是凝胶电泳分析扩增产品区域。 如果细分PCR扩展区和产品分析区,则为典型的四区隔离。四区隔离的主要目的是防止气溶胶在各PCR区域之间流动。为了避免相互污染,可以为不同区域设置正负压: 1.试剂准备区(一区):**干净的区域,保持微正压,防止外部空气进入隔离污染源。此外,阴性模板应添加PCR管并覆盖在该区域,严禁在该区域打开。储存带有DNA模板的离心管; 2.增加DNA模板(ⅱ区):保持微负压,确保内部空气不泄漏,避免阳性模板的气溶胶污染外部环境。 3.扩增及PCR产品分析区(三区):保持微负压,使内部空气不泄漏,避免扩增产物的气溶胶污染外部环境。 在进入PCR实验室时,需要遵循一个方向进行操作不能逆向进行。 否则,可能会产生气溶胶污染和假阳性结果!